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BIOESN
細(xì)胞·簡(jiǎn)介
?單核細(xì)胞及由單核細(xì)胞演變而來(lái)的具有吞噬功能的巨噬細(xì)胞，稱為單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)。單核細(xì)胞發(fā)生于骨髓的多能干細(xì)胞，循環(huán)于血液中，穿透血管內(nèi)皮進(jìn)入組織內(nèi)，轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞。單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)在體內(nèi)分布廣，細(xì)胞數(shù)量多，主要分布于疏松結(jié)締組織、肝、脾、淋巴結(jié)、骨髓、腦、肺以及腹膜等處，并依其所在組織的不同而有不同的名稱。 ?單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞有很強(qiáng)的吞噬能力醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)整理，能吞噬異物、細(xì)菌、衰老和突變的細(xì)胞等。此外，也吞噬抗原抗體復(fù)合物，并參與脂質(zhì)與膽固醇代謝，可吞噬和蓄積脂質(zhì)。吞噬的生理意義在于消除體內(nèi)不需要的物質(zhì)，其中巨噬細(xì)胞與淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞，在功能上，有互相促進(jìn)和互相抑制的作用。當(dāng)單核吞噬細(xì)胞系的生理功能失調(diào)時(shí)，可引起多種疾病。 ?巨噬細(xì)胞（英語(yǔ)：Macrophages，縮寫為m?）是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來(lái)源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)（先天性免疫）和特異性防衛(wèi)（細(xì)胞免疫）。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞容易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長(zhǎng)期生存。 BIOESN 細(xì)胞的主要特點(diǎn) 科學(xué)家以基因改造的方式，讓老鼠的轉(zhuǎn)型生長(zhǎng)因子β，無(wú)法對(duì)在外周循環(huán)中的巨噬細(xì)胞發(fā)出訊號(hào)。科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，如此做后，外周循環(huán)的巨噬細(xì)胞會(huì)大舉進(jìn)入老年失智癥老鼠的大腦中。 康乃狄克州耶魯大學(xué)醫(yī)學(xué)院陶恩說(shuō)，外周循環(huán)巨噬細(xì)胞滲透大腦的動(dòng)作，即是老年失智癥老鼠的療方。這項(xiàng)結(jié)果大出陶恩意料。之前科學(xué)家的論點(diǎn)是，提高大腦的免疫反應(yīng)可能加重發(fā)炎，因而對(duì)病情有害。實(shí)驗(yàn)中，基改老鼠的腦斑有九成消失無(wú)蹤，而且老鼠的官能反應(yīng)也獲得改善，例如走迷宮不再那么容易迷失方向。陶恩說(shuō)，若科學(xué)家能以藥物，封阻人體外周循環(huán)中的轉(zhuǎn)型生長(zhǎng)因子β，應(yīng)該也能達(dá)到動(dòng)員外周巨噬細(xì)胞進(jìn)入大腦，清除老人斑的目的。陶恩的研究團(tuán)隊(duì)已將研究重心，改為尋找可封阻轉(zhuǎn)型生長(zhǎng)因子β 的藥物。 BIOESN 培養(yǎng)方法 巨噬細(xì)胞也建有無(wú)限細(xì)胞系，大多來(lái)自小鼠，如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等，均獲惡性，培養(yǎng)中呈巨噬細(xì)胞形態(tài)和吞噬功能，易于傳代和瓶壁分離，但難以建株。培養(yǎng)巨噬細(xì)胞可用各樣方法和各種來(lái)源來(lái)獲取細(xì)胞，以小鼠腹腔取材法最為實(shí)用，其法如下: 1、實(shí)驗(yàn)前三天，向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無(wú)菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi)）。 2、引頸殺死動(dòng)物，手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3～5秒。 3、置動(dòng)物于解剖臺(tái)上，用針頭固定四肢，雙手持鑷撕開(kāi)皮膚拉向兩側(cè)，暴露出腹膜，但勿傷及腹膜壁。 4、再用70%酒精擦洗腹膜壁后，用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中，同時(shí)從兩側(cè)用手指揉壓腹膜壁，令液體在腹腔內(nèi)充分流動(dòng)。 5、用針頭輕輕挑起腹壁，使動(dòng)物體微傾向一側(cè)，使腹腔中液體集于針頭下吸取入針管內(nèi)。 6、小心拔出針頭，把液體注入離心管中，250g4℃離心10分鐘，去上清，加10mlEagle培養(yǎng)基。 7、計(jì)數(shù)細(xì)胞，每只小鼠可產(chǎn)生20～30×105細(xì)胞，其中90%為巨噬細(xì)胞。 8、為獲取3×105帖附細(xì)胞/平方厘米，需接種2.5×106/ml。 9、為純化培養(yǎng)細(xì)胞，去除其它白細(xì)胞，接種數(shù)小時(shí)后，去除培養(yǎng)液，用Eagle液沖洗1～2次后，再加新Eagle培養(yǎng)液置37℃CO2溫箱中培養(yǎng)。 BIOESN 巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子有那些？ 巨噬細(xì)胞是一種位于組織內(nèi)的白血球。它能吞噬和消化病原體以及組織崩解產(chǎn)物，這個(gè)過(guò)程稱吞噬作用。它們通常存在于所有的組織中，其主要功能是清除所有死亡的細(xì)胞和組織。此外，巨噬細(xì)胞有迅速分泌多種炎癥介質(zhì)，影響炎癥反應(yīng)的發(fā)展。巨噬細(xì)胞因子是指巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一系列細(xì)胞因子，包括促炎細(xì)胞因子、抗炎細(xì)胞因子和趨化因子。 當(dāng)巨噬細(xì)胞受到炎癥刺激時(shí)，它們會(huì)分泌細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子（TNF）、IL-1、IL-6、IL-8和IL-12。雖然單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞是這些細(xì)胞因子的主要來(lái)源，但它們也由活化的淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生。此外，巨噬細(xì)胞還會(huì)釋放趨化因子、白三烯和前列腺素。所有這些分子都可能誘導(dǎo)血管通透性增加和炎癥細(xì)胞的招募。除了局部效應(yīng)外，這些介質(zhì)還產(chǎn)生全身效應(yīng)，如發(fā)熱和產(chǎn)生急性炎癥反應(yīng)蛋白。 炎癥受到多種抑制劑和拮抗劑的嚴(yán)格調(diào)控。巨噬細(xì)胞釋放的抗炎細(xì)胞因子主要包括IL-10和TGF-β。 IL-10是一種35kD的細(xì)胞因子，由活化的巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生。它的主要作用是抑制巨噬細(xì)胞活化，以及TNF、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12和GM-CSF的產(chǎn)生。IL-10可抑制活化巨噬細(xì)胞MHC-II表達(dá)，因此是抗原呈遞的強(qiáng)效抑制劑。巨噬細(xì)胞本身也受到IL-10的影響，當(dāng)巨噬細(xì)胞暴露于IL-10這種細(xì)胞因子會(huì)降低它們的殺微生物活性，并降低它們對(duì)IFN-γ的反應(yīng)能力。 TGF-β與IL-10一起，是另一種強(qiáng)大的抗炎細(xì)胞因子，作用于許多靶細(xì)胞，并能調(diào)和TNF、IL-1β和IL-12等炎癥作用。TGF-β是Th1和Th2細(xì)胞的強(qiáng)效抑制因子，但卻能促進(jìn)Tregs的功能。TGF-β還與造血有關(guān)，在胚胎發(fā)生、組織再生、細(xì)胞增殖和分化中具有重要作用。 趨化因子是一種特殊的肝素結(jié)合細(xì)胞因子家族，能夠在趨化作用的過(guò)程中引導(dǎo)細(xì)胞遷移。趨化因子在控制免疫細(xì)胞趨化方面起著至關(guān)重要的作用。此外，一些趨化因子在發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮作用，促進(jìn)血管生成，或引導(dǎo)細(xì)胞到組織中，為細(xì)胞的分化提供關(guān)鍵信號(hào)。巨噬細(xì)胞釋放的趨化因子主要包括CXCL1、CXCL2、CCL5、CXCL8（IL-8）、CXCL9、CXCL10和CXCL11。 BIOESN 熱滅活的血清適合培養(yǎng)巨噬細(xì)胞？ 上一篇：技術(shù)文章|標(biāo)簽蛋白純化之His標(biāo)簽
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名稱 J7 74小鼠巨噬細(xì)胞
形態(tài) 不規(guī)則形 傳代方法 1:2傳代，2~3天換液 營(yíng)養(yǎng)體系 DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS+1%雙抗
促炎細(xì)胞因子
抗炎細(xì)胞因子
趨化因子